В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность. Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

• I (0) – ά, β - поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
• II (А) – β - на поверхности имеется антиген А и антитело β;
• III (В) – ά - поверхность содержит В с антителом типа ά;
• IV (АВ) – 00 - поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.

Методы определения

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система - посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.

Разведение производится так:

Непосредственно исследование проводится таким образом:

1. На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
2. Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Правила расшифровки результатов

Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

Видео: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

• Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) - определение первой группы;
• Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II - определение второй;
• При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы - определение III;
• Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной - определение IV.

Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками				Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами			Группы крови
0(I)	A(II)	B(III)	AB(IV)	0(I)	A(II)	B(III)
–	–	–	-	–	+	+	0(I)
+	–	+	-	–	–	+	A(II)
+	+	–	-	–	+	–	B(III)
+	+	+	–	–	–	–	AB(IV)

Агглютинация;

– агглютинация отсутствует;

— реакцию не проводят.

Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны - синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.

Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.

	Вид цоликлонов		Группа крови
Результат агглютинации	Анти-А	Анти-В
	-	-	0(I)
	+	-	A(II)
	-	+	B(III)
	+	+	AB(IV)

IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

• Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
• Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
• Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
• Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов

Возможны два способа определения групп крови:

• при помощи стандартных сывороток, когда устанавливают наличие или отсутствие в эритроцитах антигенов А и В, т. е. как определяют группы крови у реципиентов;
• по стандартным сывороткам определяют в эритроцитах антигены и одновременно с помощью стандартных эритроцитов исследуют сыворотку (плазму) крови на присутствие в ней изоагглютининов аир (перекрестный способ).

Оснащение для определения групп крови

Оснащение для определения групп крови:

2 - физиологический раствор;

3 - стакан для промывных вод;

4 - вода для промывания пипеток и палочек;

7 - пятиминутные песочные часы;

8 - штатив со стандартными сыворотками;

9 - глазные лопаточки для перемешивания капель;

«Семинары по переливанию крови»,

Л.В.Иванов, И.П.Данилов, Б.А.Шуваева

Прежде чем следовать каким-либо советам, проконсультируйтесь с врачом.

Правила определения группы крови цоликлонами

Очень часто определение группы крови выполняется цоликлонами. Цоликлоны подразделяются на анти-А и анти-В. Их использование в медицине популярно из-за возможности определения не только группы крови. Резус они также демонстрируют. Для этого используется система АВО, которая заменяет обычные сыворотки, основой которых является агглютинирующий изогем.

Чтобы определить группу или резус, реагентами осуществляется поиск указанных выше антигенов, которые присутствуют в эритроцитах. Для этого применяются антитела стандартного типа. Также стандартными эритроцитами выявляются агглютины, вне зависимости от того, используется плазма или специальная сыворотка для исследования. Когда речь идет об анализе донорских образцов, требуется в обязательном порядке определить также и присутствие в сыворотке агглютининов. Применяются для этого эритроциты стандартного типа.

В качестве основы цоликлонов используются гибридомные линии клеток. Получаются они в результате совмещения антителообразующих В-лимфоцитов мышиного происхождения с клетками миеломы того же живого организма. С помощью гибридомов, которые являются индивидуальными, продуцируются антитела гомогенного типа. При этом может быть в итоге только один иммуноглобулический класс. Эти вещества почти полностью повторяют структуру и активность с биологической точки зрения.

Подготовка к работе

Чтобы определить цоликлонами группу крови и резус, существует специальный алгоритм. Такая техника работы предполагает лабораторное определение. В лаборатории должны поддерживаться определенные температурные показатели – в пределах от 15 до 25 градусов по Цельсию. Кроме этого, требуется хорошее освещение.

Для хранения всех реагентов используются плотно закрытые сосуды. Это необходимо, чтобы не допустить высыхания. В результате этого процесса может серьезно снизиться активность антител.

Для работы запрещено пользоваться мутными с присутствием хлопьев реагентами. Используется для работы индивидуальная пипетка. Для проведения процедуры предполагается использование планшета, окрашенного в белый цвет с хорошо смоченной поверхностью. За счет такого фактора, как высокая авидность и активность цоликлонов, достаточно одной реагентной серии для использования.

Чтобы выполнить исследование на группу крови, предварительно нужно подготовить все оборудование и реагенты. В частности:

• подготавливается типовая тарелочка, сухая, на ней будет выполняться весь анализ;
• подготавливаются цоликлоны обоих типов, а также две пипетки для работы с каждым по отдельности и две палочки, выполненные из стекла, которыми выполняется перемешивание;
• потребуется одноразовый шприц с иглой, которой осуществляется забор крови.

В лоток, прошедший стерилизацию, выкладываются три шарика, которые предварительно смачиваются спиртом, а также три стерильные салфетки. Для забора потребуется резиновый жгут. Сбор осуществляется в пробирку центрифужного типа без какой-либо жидкости. На ней с помощью стеклографа требуется отчетливо прописать фамилию пациента. Кроме этого, заполняется бланк, который служит лабораторным направлением. Врач-лаборант повторно определит все основные показатели и поставит печать и подпись.

Определение результатов

Чтобы получить верный результат анализа, требуется провести внутривенную пункцию с соблюдением всех правил по забору. Достаточно для определения будет пяти миллилитров.

Цоликлоны анти-А и анти-В в условиях лаборатории наносятся на планшеты. Потребуется одна большая капля. Каждая помечается соответствующими надписями. Рядом с ними необходимо нанести капли крови в небольшом количестве.

Индивидуальная палочка из стекла служит для перемешивания образца и реагентов. Соотношение крови к реагентам должно составлять один к десяти. Для наблюдения реакции достаточно двух с половиной минут.

Всего пяти минут при помешивании капель достаточно для наблюдения результата. Он должен быть оценен врачом. Таблица, расположенная ниже, содержит результаты, на которые стоит ориентироваться при работе с сывороткой при использовании эритроцитов стандартного типа.

Если определяется группа крови АВ у новорожденных для исключения аутоагглютинации, то требуется контрольное исследование. Для этого одна капля изотонического раствора хлористого натрия смешивается в указанной выше пропорции с кровью, направленной на исследование. Если реакции агглютинации нет, то кровь действительно соответствует группе АВ.

Для определения резус-фактора алгоритм подготовки используется тот же самый. После того, как все предметы для определения резус-фактора готовы, выполняется исследование.

Для этого на планшет требуется нанести большую каплю реагента анти-D-супер. Рядом в той же пропорции один к десяти наносится капля крови, отправленной на исследование. С помощью индивидуального инструмента производится смешивание реагента и крови, затем оценка результата.

Если процесс агглютинации начался, то кровь имеет положительный резус-фактор, если процесс не начинается, соответственно, речь идет об отрицательном резус-факторе. Стоит подчеркнуть, что у моноклональных реагентов имеются некоторые преимущества в сравнении со стандартными сыворотками. В частности, результат в таком случае куда точнее, а сама процедура более безопасная, безболезненна и не отнимает много времени.

Составление наборов и определение групповой принадлежности и резус-фактора крови

Определение группы крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В

1. Приготовить тарелку, цоликлоны, стеклянные палочки, часы, исследуемую кровь

1. Разделить тарелку полосой фломастера на 2 части

1. Нанести на тарелку по одной капле цоликлона анти-А и анти-В

1. Нанести на тарелку по одной капле крови (рядом с каплей цоликлона), каждая из которых в 10 раз меньше капли цоликлона

1. Разными концами стеклянных палочек перемешать

1. Покачивать в течение 2,5 минут

агглютинации нет – 1 группа крови

агглютинация в анти-А - 2 группа крови

агглютинация в анти-В - 3 группа крови

агглютинация в обеих каплях – 4 группа крови

1. Приготовить пробирки, пипетки, физраствор (раствор хлорида натрия 0,9 %), универсальный реагент-антирезус, исследуемую кровь

1. Нанести на стенку пробирки каплю универсального реагента-антирезуса и каплю крови, равных по размеру

1. Покачивать 3 минуты

1. Добавить 3 мл. физраствора

Наличие агглютинации – исследуемая кровь резус-положительная

Отсутствие агглютинации – исследуемая кровь резус-отрицательная

Составление наборов и проведение проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента

Проба на совместимость по АВО (по группе крови)

1. Приготовить тарелку, кровь донора во флаконе, сыворотку реципиента в пробирке, часы и стеклянные палочки

1. На тарелку нанести каплю сыворотки реципиента и каплю крови донора из флакона

1. Смешать стеклянными палочками и покачивать 5 минут

Наличие агглютинации – кровь несовместима по АВО

Отсутствие агглютинации – кровь совместима по АВО

Проба на совместимость по резус-фактору

1. Приготовить кровь донора во флаконе, сыворотку реципиента в пробирке, пробирку, пипетки, раствор полигюкина (33 %)

1. В пробирку 2 капли крови донора, 1 каплю крови реципиента и 1 каплю раствора полиглюкина (33 %)

1. Покачивать 5 минут

1. Добавить физраствор (2-3 мл)

Наличие агглютинации – кровь несовместима по резус-фактору

Отсутствие агглютинации – кровь совместима по резус-фактору

Составление наборов инструментов для венесекции и катетеризации подключичной вены

1. Приготовить в стерильный лоток стерильные марлевые шарики, пинцет анатомический, для обработки операционного поля; шприц с раствором новокаина для местной анестезии (0,25 %); 2 стерильные лигатуры; 1 стерильный катетер и стерильный скальпель; стерильные иглодержатель с иглой и шовный материал

1. Спросить пациента о переносимости новокаина

1. Операция проводится под местным обезболиванием в области вены локтевого сгиба (выделяется оперативно вена; под вену подводят 2 лигатуры; 1-ой лигатурой перевязывается периферический отрезок вены; вена надрезается и вставляется катетер, который фиксируется лигатурой; рана ушивается; к ластиковому катетеру присоединяется система для переливания крови)

Набор для катетеризации подключичной вены

1. для обработки кожи антисептики, стерильные марлевые шарики на стерильном лотке

2. для обезболивания шприц с новокаином 0,5% 10 мл

3. катетер для подключичной вены одноразовый

Использование перчаток и других средств индивидуальной защиты при работе с кровью

До работы с кровью

1. Надеть очки, маску

1. Обработать руки хирургическим способом

1. Надеть стерильные перчатки

Если перчатки были в контакте с биологическими средами одного больного, то касаться кожи (раны) другого больного или проводить какие-либо инвазивные манипуляции другому больному недопустимо!

После работы с кровью

1. Погрузить перчатки в дезраствор на 1 час

1. Поместить в специальный пакет (желтый пакет, группа В)

1. Отправить на утилизацию

Проведение инфузионной терапии в центральную вену

1. Приготовить стерильный лоток со стерильным шприцем, перевязочный материал, стерильную систему для введения стерильных растворов, два флакона со спиртом, пинцет, штатив, 10% изотонический раствор хлорида натрия, раствор гепарина.

2.Заполнить систему для капельного введения стерильных растворов.

3.Собрать стерильный шприц, набрать 5 мл изотонического раствора хлорида натрия (для промывания катетера).

4.Попросить больного повернуть голову в противоположную сторону от подключичного катетера и задержать дыхание.

5.Снять заглушку подключичного катетера.

6.Опустить заглушку во флакон со спиртом.

7.Подсоединить канюлю стерильного шприца к подключичному катетеру, разрешить больному дышать.

8.Проверить нахождение подключичного катетера в вене (натянуть поршень шприца на себя), при появлении крови ввести 2 мл изотонического раствора хлорида натрия.

9.Попросить больного задержать дыхание.

10.Отсоединить шприц и ввести в подключичный катетер канюлю капельницы.

12.Отрегулировать определенное количество капель.

13.Закрыть замок на капельнице, закончив вводить стерильный раствор в подключичный катетер.

14.Попросить больного повернуть голову в противоположную сторону от подключичного катетера и задержать дыхание.

15.Убрать канюлю капельницы.

16.Ввести в подключичный катетер 0.2 мл гепарина с 2 мл изотонического раствора хлорида натрия для предупреждения образования тромбов (по окончанию вливания - гепариновый замок).

17.Закрыть вход в подключичный катетер заглушкой, вытащив ее из флакона со спиртом с помощью пинцета. Продолжать дыхание.

ПРИМЕЧАНИЕ: При длительном внутривенном вливании стерильных растворов необходимо периодически под контролем рентгена проверять нахождение подключичного катетера в вене.

Осуществление ухода за катетером в центральной вене

1. Обработать кожу вокруг катетера раствором спирта (70 град.), раствором бриллиантового зеленого (1 %)

1. Провести контроль на отсутствие перегибов, плотности резиновой пробки

1. Проверить проходимость катетера: подсоединить шприц с 20 мл. физраствора, попросить больного задержать дыхание на вдохе, потянуть поршень и кровь должна войти в шприц беспрепятственно

1. Смену инфузионной системы производить только на вдохе

1. После каждой инфузии ввести 5 тыс. единиц гепарина и плотно закрыть пробкой

44. Наложение и снятие узлового шва Наложение и снятие узлового шва

1) Спросить больного о лекарственной переносимости

2) Приготовить на стерильном лотке пинцеты анатомический, хирургический, иглодержатель с иглой, шелк, ножницы

3) Обработать кожу раствором антисептика (йодонат) с помощью анатомического пинцета

4) Захватить край раны пинцетом хирургическим

5) Сделать вкол, отступая 0,5 см от края раны

6) Противоположный край раны прошивают напротив предыдущего (отступая 0,5 см)

7) Узлы завязывать с одной стороны от раны

9) Следующий шов на расстоянии 1 см

1) Смазать рану раствором йодоната

2) Пинцетом анатомическим захватить за узелок и потянуть по направлению к рубцу (не от рубца и не вверх, т.к. молодой неокрепший рубец может разойтись)

3) Из кожи появляется белая не прокрашенная нить; ее пересечь

Удалить нить из канала шва

4)Если показалась капля крови, гноя или лимфы - сообщить врачу, т.к. это воспаление

Осуществление перевязок больных с чистыми и гнойными ранами

1. Надеть стерильные перчатки

1. Перед снятием бинтовой повязки (присохшей к ране) оросить повязку раствором перекиси водорода (3 %)

1. Осторожно снять повязку

1. Промыть рану раствором перекиси водорода (3 %) (обладает свойством антисептика с широким спектром, в том числе уничтожает клостридии и грибки; устраняет неприятные запахи из раны и останавливает кровотечение)

1. Наложить салфетку, смоченную раствором фурациллина (1:5000)

1. Наложить стерильную бинтовую повязку

Порядок действий тот же. Рану ведут по правилу 3 фаз раневого процесса: гидратации, дегидратации и эпителизации.

1. В фазе гидратации (в ране много гноя и выраженный отек мягких тканей)

Применяются повязки с мазями на водной основе (дизоли с антисептиками), ферментами (трипсин, химотрипсин, пепсин); противопоказано физлечение

2. В фазе дегидратации (гноя мало, отек спадает)

Применяются мази на жировой основе. Перевязки можно делать реже (1 раз в 2-3 дня). Возможна физиотерапия.

3. В фазе эпителизации (заживление раны завершается)

В общем: применяется иммунокорекция, дезинтоксикация и стимуляция репаративных процессов в ране.

Осуществление туалета раны

Туалет раны проводится при свежих ранах (неглубоких, в толще кожи, которые при первичном натяжении не оставят грубого рубца). В остальных случаях проводится ПХО раны.

1. Приготовить на стерильном лотке стерильный перевязочный материал (салфетки, турунды, шарики), пинцет анатомический или зажим Бильрота, дренажи марлевые или резиново-марлевые

1. Надеть стерильные перчатки

1. Промыть рану раствором перекиси водорода (3 %) (обладает свойством антисептика с широким спектром, в том числе уничтожает клостридии и грибки; устраняет неприятные запахи из раны и останавливает кровотечение) или раствором фурациллина (1:5000)

1. Края раны обработать раствором спирта (70 град.), смазать раствором бриллиантовой зелени (1 %)

1. Наложить стерильную бинтовую повязку или заклеить клеем БФ-6

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:

Оснащение для определения группы крови

и подростковая гинекология

и доказательная медицина

и медицинскому работнику

Определение группы крови и резус-фактора

Алгоритм действий при определении группы крови и резус-фактора

при поступлении женщины в родильный дом

Определение группы крови системы АВ0 моноклональными антителами

Подготовить:

• сухое предметное стекло (типовую тарелочку) для определения группы крови;
• цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета);
• две пипетки для взятия цоликлонов из флаконов;
• две стеклянные палочки для смешивания крови пациентки с цоликлонами;
• одноразовый шприц (на 5-10 мл) с иглой для взятия крови из вены пациентки;
• в стерильный лоток положить 3 шарика, смоченных спиртом, 2-3 стерильные салфетки;
• резиновый жгут для внутривенных пункций;
• сухую центрифужную пробирку, на которой стеклографом отчетливо подписать фамилию пациентки;
• бланк - направление в лабораторию, где врачом - лаборантом повторно определяется группа крови, резус принадлежность, ставится печать и подпись

Соблюдая все правила для внутривенных пункций, произвести забор крови из вены пациентки (не менее 5 мл).

• Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пластинку по одной большой капле (0,1) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В.
• Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл).
• После смешивания реагентов и крови разными стеклянными палочками для анти-А и анти-В в соотношении 1:10 за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2,5 мин.
• Чтение результатов через 5 минут при помешивании капель. (от 3-х до 5 минут)
• Результат оценивается врачом. Оценка результатов реакции агглютинации с Цоликлонами анти-А и анти-В представлена в таблице, в которую также включены результаты определения агглютининов сыворотке (плазме) доноров с помощью стандартных эритроцитов.

С целью исключения аутоагглютинации, которая может наблюдаться в пуповинной крови новорожденных, в случае установления группы крови АВ(IV) необходимо произвести контрольное исследование: одну каплю (0,1 мл) изотонического раствора хлористого натрия смешать с маленькой каплей (0,01 мл) исследуемой крови. Реакция агглютинации должна ОТСУТСТВОВАТЬ.

А.Внимательно заполнить все графы бланка - направления в лабораторию для определения группы крови и резус принадлежности с подписью врача.

В. Доставить бланк-направление и пробирку с кровью пациентки в лабораторию для тщательного определения группы крови и резус принадлежности пациентки.

Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (Цоликлон анти-D Супер)

На тарелку наносят большую каплю реагента (около 0,1 мл). Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом. Реакция агглютинации начинает развиваться черезсек, четко выраженная агглютинация наступает черезсек. (резус положительная, нет агглютинации – резус отрицательная). Результаты реакции учитывают через 3 мин.

Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а черезсек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Экспресс-определение групп крови АВО и резус с использованием набора «Эритротест-группокарт»

Набор «Эритротест-группокарт» (ООО «Гематолог», Москва) предназначен для определения АВО и Резус (RhD) групп крови человека в лабораторных и полевых условиях. Определение проводится в реакции прямой гемагглютинации и не требует никаких вспомогательных реактивов и оборудования. В состав набора входят:

• карточка «Эритротест-группокарт»;
• пипетка с дозированным объемом капли около 0,02 мл;
• стерильно упакованный скарификатор;
• палочка для смешивания крови с реагентом.

В лунках карточки находятся высушенные моноклональные реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ и анти-D, которые немедленно растворяются при добавлении воды. Моноклональные анти-D-антитела специфично выявляют антиген RhD независимо от группы АВО. В последней лунке находится растворитель для постановки контроля на неспецифическую аутоагглютинацию.

Определение производят в нативной крови с консервантом, в крови без консерванта или крови, взятой из пальца.

• Вскрывают упаковку и достают карточку, не дотрагиваясь до лунок с рабочей поверхностью. Вписывают данные пациента, кроме группы крови.
• В каждую лунку вносят 1 каплю воды (водопроводной или дистиллированной), используя вложенную в набор пипетку. Воду наносят на пятно высушенного реагента. Нельзя допускать подсыхания капли.
• Вносят в каждую лунку маленькую каплю исследуемой крови. Кровь наносят рядом с каплей реагента, не касаясь его, чтобы избежать загрязнения одного реагента другим. Для взятия крови из пальца используют стерильный скарификатор.
• Тщательно смешивают кровь с реагентом с помощью палочки, вложенной в набор. В каждой лунке смешивание производят только новой палочкой. Использование одной палочки для перемешивания в разных лунках не допустимо, т. к. ведет к загрязнению реагентов и ошибочному определению группы крови.
• Сразу покачивают пластинку. Четкая агглютинация наступает черезс, однако окончательный результат следует учитывать через 3 мин, т.к. в случае слабых форм антигена А реакция наступает позднее, а агглютинаты мельче.
• Результат оценивают визуально (табл. 18.6). В квадраты под каждой лункой вписывают результат реакции с соответствующим реагентом (+ или -).

Срок хранения набора «Эритротест-группокарт» - 2 года при температуре 2- 8°С. Допускается хранение в течение 1 года без холодильника, если температура не превышает 25°С. Хранение и использование незапаянных или поврежденных пакетов не допускается.

Обратите внимание! Диагностика и лечение виртуально не проводятся! Обсуждаются только возможные пути сохранения вашего здоровья.

Стоимость 1 часаруб. (с 02:00 до 16:00, время московское)

С 16:00 до 02:р/час.

Реальный консультативный прием ограничен.

Ранее обращавшиеся пациенты могут найти меня по известным им реквизитам.

Заметки на полях

Нажми на картинку -

Просьба сообщать о неработающих ссылках на внешние страницы, включая ссылки, не выводящие прямо на нужный материал, запрашивающие оплату, требующие личные данные и т.д. Для оперативности вы можете сделать это через форму отзыва, размещенную на каждой странице.

Остался неоцифрованным 3-й том МКБ. Желающие оказать помощь могут заявить об этом на нашем форуме

В настоящее время на сайте готовится полная HTML-версия МКБ-10 - Международной классификации болезней, 10-я редакция.

Желающие принять участие могут заявить об этом на нашем форуме

Уведомления об изменениях на сайте можно получить через раздел форума «Компас здоровья» - Библиотека сайта «Островок здоровья»

Выделенный текст будет отправлен редактору сайта.

не должна использоваться для самостоятельной диагностики и лечения, и не может служить заменой очной консультации врача.

Администрация сайта не несёт ответственности за результаты, полученные в ходе самолечения с использованием справочного материала сайта

Перепечатка материалов сайта разрешается при условии размещения активной ссылки на оригинальный материал.

© 2008 blizzard. Все права защищены и охраняются законом.

Техника определения группы крови системы АВ0 стандартными сыворотками

Показания: необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательств.

Приготовить: стандартную тарелочку с углублениями; набор стеклянных палочек; изотонический раствор хлорида натрия; набор гемагглютинирующих сывороток 1, 2, 3, 4 групп двух серий; пипетки; исследуемую взятую из вены или пальца кровь; часы; лотки; перчатки; емкости для отработанного материала; контейнеры с дезинфицирующими растворами.

1. Медицинская сестра полностью подготовлена к выполнению манипуляции: одета в костюм (халат), маску, перчатки, колпак, сменную обувь.
2. Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по: цветовой маркировке, внешнему виду (светлая, прозрачная); сохранность упаковки, наличию правильно оформленной этикетки.
3. Подготовить все необходимое для выполнения манипуляции.

На белую тарелочку, согласно обозначению, последовательно нанести по одной капле сыворотки 1, 2, 3 групп двух серий. Каждую пипетку немедленно опускать в ту же ампулу (флакон) из которых они были взяты;

С помощью стеклянной палочки нанести рядом с углублениями (6 углублений) по капле исследуемой крови. Капля крови должна быть в 10 раз меньше капли сыворотки;

Отметить время и чистой, сухой стеклянной палочкой перемешать кровь с сывороткой 1 гр., затем другой палочкой 2 гр. и т.д. во всех углублениях;

По мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минуты, в те капли, в которых наступила реакция агглютинации добавить по одной капле изотонического раствора хлорида натрия для исключения ложной агглютинации и продолжать наблюдение в течение 5 минут.

а) при положительной реакции в смеси появляются видимые глазом мельчайшие зернышки, состоящие из склеившихся эритроцитов. Мелкие зерна сливаются в крупные зерна, а иногда в хлопья, сыворотка при этом – обесцвечивается;

б) при отрицательной реакции жидкость остается равномерно окрашенной в розовый цвет;

в) возможны 4 комбинации положительной и отрицательной реакции:

1. Если агглютинации нет ни в одной из ячеек, то кровь I (0) группы.

2. Если агглютинация в первой и третей ячейках, то кровь II (А) группы.

3. Если агглютинация в первой и второй группах, то кровь III (В) группы.

4. Если агглютинация в первой, второй, третей ячейках, то кровь IV (АВ) группы.

Для исключения ошибки проверяют кровь с сывороткой 4 группы, где агглютинации не должно быть.

1. Снять перчатки, поместить их в дезинфицирующий раствор.
2. Вымыть руки, осушить полотенцем.

Примечание: определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 – 25 0 С.

Приготовить оснащение для определения группы крови и резус-фактора;

КОРМЛЕНИЕ БОЛЬНОГО ЧЕРЕЗ ЗОНД

ПРИГОТОВИТЬ: стерильный тонкий желудочный зонд, глицерин, воронку емкостью 200 мл, жидкую теплую пищу в количестве 3-4 стаканов (бульон, сливки, сок), стакан теплой воды, бинт.

1. Пригласить врача.

2. Очистить носовые проходы больного.

3. Смочить конец зонда глицерином, голову больного слегка наклонить вперед, помочь врачу ввести зонд ч/з носовой проход и пищевод, а затем в желудок.

4. Соединить конец зонда с воронкой.

5. Медленно вливать в воронку небольшими порциями подготовленную пищу, а затем кипяченную воду.

6. Воронку снять, промыть.

7. Наружный конец зонда укрепить с помощью зонда, введенного ч/з гастрому, используется та же пища, но малыми порциями (по 50 мл 8 раз в сутки, постепенно увеличивая до 500 мл на одно кормление).

1) Осмотреть края свищевого отверстия.

2) Произвести туалет вокруг кожи свища (обработать спиртом, смазать пастой Лассара).

3) Зонд укрепить липким пластырем на коже живота.

4) Наложить сухую стерильную повязку.

Оснащение для определения группы крови:стандартные гемагглютинирующие сыворотки 1,2,3,4 групп двух различных серий, изотонический раствор натрия хлорида, пипетки - 7 штук, стеклянные палочки - 7 штук, скарификатор, песочные часы, вата, спирт, тарелка, резиновые перчатки, емкость с дезраствором.

Оснащение для определения резус – фактора:пробирка, изотонический раствор натрия хлорида, антирезусная сыворотка, пипетки – 2 штуки, емкость с дезраствором.

Приказом ФМБА России

от 30.03.2007 № 88

ФЕДЕРАЛЬНОЕ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЕ АГЕНТСТВО

Составление набора и определение групповой принадлежности крови по стандартным сывороткам

Выявление признаков непригодности крови к переливанию.

Показание:определение годности крови к переливанию.

Оснащение:флакон или контейнер с кровью.

1. Оценить герметичность упаковки:

Упаковка должна быть абсолютно целостной;

Никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличии кровь непригодна для переливания.

2. Оценить правильность паспортизации:

· - наличие этикетки с номером;

· - обозначение группы крови и резус принадлежности;

· - фамилии и инициалов донора;

· - наименование учреждения- заготовителя;

· - штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит.

3. Обратить внимание на срок годности крови, сопоставить его с датой переливания, оценить визуально кровь во флаконе:

· кровь должна быть разделена на три слоя (внизу – красные эритроциты, выше - узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней - желтая прозрачная плазма);

· плазма должна быть прозрачной;

· хлопья, плёнки, сгустки в плазме свидетельствуют о её инфицированности и непригодности к переливанию;

· розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию.

Примечание: Плазма может быть непрозрачной в случае так называемой хиллезной крови, т.е. крови, содержащей большое количество нейтральных жиров. При нагревании хиллезной крови до 37 0 С, плазма становится прозрачной, если же кровь инфицирована - остаётся мутной.

Составление набора и определение групповой принадлежности крови по стандартным сывороткам.

Показания:необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательству.

· 2 серии стандартных гемагглютинирующих сывороток в специальных штативах;

· флакон с изотоническим раствором хлорида натрия;

· пипетка для взятия крови;

· пипетка для изотонического раствора;

· песочные часы на 5 минут;

Примечание. Определение группы крови проводится в помещении с хорошим освещением и температурой от + 15 0 до +20 0 .

Манипуляцию выполнять в перчатках.

При наличии повреждений на коже медсестра временно отстраняется от работы.

В случае попадания крови на кожу или слизистые провести обработку по действующей инструкции (см. «Асептика, антисептика»).

1.Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по:

· внешнему виду (светлая, прозрачная);

· наличию правильно оформленной этикетки с указанием группы крови, титра, срока годности, места приготовления.

2.Разместить на столе:

· 2 комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток трёх групп (О, А, В) двух серий и одну ампулу с сывороткой АВ (ІV), каждая ампула должна иметь пипетку;

· флакон с изотоническим раствором, пипетку;

· стерильный маркированный планшет;

· предметные стёкла (стеклянные палочки);

· пипетку для взятия крови;

3. Написать на планшете Ф.И.О. пациента, группу крови.

4. Нанести на планшет по одной капле (0,1 мл.) стандартных гемагглютинирующих сывороток трёх групп двух серий в соответствующие гнезда планшета.

5. Нанести каплю крови из пальца или из пробирки пипеткой в соответствующую ячейку.

6. Поместить в каждое гнездо планшета, рядом с сывороткой, по одной маленькой капле (0,1 мл.) исследуемой крови в соотношении кровь: реагент 1:10 (кровь забирать из большой капли, используя для этого разные стеклянные палочки).

7. Смешать кровь с реагентом, после смешивания планшет осторожно покачать в руках.

8. Добавить по одной капле 0,9 % раствора натрия хлорида к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, но не ранее, чем через 3 минуты.

9. Оценить результат через 5 минут после начала реакции:

· - реакция агглютинации может быть положительной и отрицательной;

· - если сыворотки дали положительную реакцию, значит, кровь содержит оба агглютиногена АВ, в этом случае следует провести дополнительное контрольное исследование со стандартной сывороткой группы АВ (IV).

Определение групп крови цоликлонами осуществляется в реакции агглютинации. Цоликлоны представляют собой солевые растворы моноклональных антител для обнаружения антигенов эритроцитов человека. Каждый реагент строго специфичен соответствующему антигену. Моноклональные антиэритроцитарные антитела продуцируются гибридомами мыши или гетерогибридомами человек-мышь.

Методика проведения анализа

Алгоритм определения группы крови AB0 и резус-фактора цоликлонами облегчает и стандартизирует процедуру типирования. Позволяет однозначно интерпретировать результат реакции антиген/антитело. Для каждого исследования по системе AB0 достаточно одной серии реагентов. Объект исследования - цельная кровь, эритроцитарная масса, отмытые эритроциты, клетки крови в сыворотке или физрастворе. В качестве примера приводим схему проведения типирования крови человека по системе антигенов AB0.

1. Обеспечьте яркое освещение помещения и температуру воздуха 15 - 25 °C.
2. Промаркируйте лунки планшета: Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
3. Добавьте в подписанные лунки по одной капле (приблизительно 0,1 мл) реагентов Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
4. Поместите по одной маленькой капле концентрированной эритроцитосодержащей среды (0,01 - 0,03 мл) рядом с большой каплей каждого реагента.
5. В каждой из трех лунок отдельной стерильной стеклянной палочкой смешайте моноклональный реагент с кровью.
6. Плавно покачивайте планшет 2,5 - 3 минуты. Обычно агглютинация формируется в течение 5 - 10 секунд. Запас времени необходим для обнаружения слабых вариантов антигенов.
7. Проведите визуальную оценку результатов реакции в каждой лунке. Результат реакции свидетельствует об обнаружении соответствующего агглютиногена.

Отбор образца крови

Внесение образца в лунку

Планшет с внесенными образцами

Добавление реагентов

Планшет с эритроцитами и реагентами

Результаты реакции

Таблица результатов определения группы крови с помощью цоликлонов.

«+» - положительный результат реакции;
«-» - отсутствие агглютинации.

• Отрицательный результат реакции во всех трех лунках свидетельствует об отсутствии агглютиногенов. Группа: 0(I).
• Агглютинация с Анти-A и Анти-AB говорит о наличии агглютиногена A. Групповая принадлежность: A(II).
• Реакция в лунках с Анти-B и Анти-AB указывает на наличие антигена B. Групповая принадлежность: B(III).
• Реакция во всех трех лунках говорит о присутствии обоих антигенов. Группа: AB(IV).

Смешивание анализируемых проб с цоликлонами

Определение группы крови сo стандартными сывороткам:
Проводится под руководством врача.
1. Приготовить: тарелки, пипетки, стеклянные палочки, флакон с кровью, шарики, спирт, сыворотки 2 серий.
2. Надеть стерильную одежду.
3. Нанести отдельными пипетками стандартные сыворотки по l-й капле в ячейки специальной тарелки по 2 серии (1, 2, 3 группы).
4. Нанести стеклянной палочкой мазок крови каждой капли сыворотки.
5. Смешать отдельными стеклянными палочками.
6. Добавить в каждую серию по 1 капле физиологического раствора.
7. Наблюдать за реакцией в течение 5 мин.
8. Поставить реакцию с IV группой, если во всех 6 ячейках тарелки произошла реакция агглютинация, для подтверждения результата

Определение группы крови с применением цоликлонов:

1. Обработать ампулы с цоликлонами и ампулы с растворителем спиртом.
2. Вскрыть ампулы с цоликлонами анти-А и анти-В и 2 ампулы растворителя
3. Перенести растворитель отдельными пипетками в ампулы с цоликлонами.
4. Встряхнуть несколько раз, закрыть ампулы (полученные реагенты можно хранить до 3 месяцев).
5. Нанести одну большую кашпо цоликлона анти-А и анти-В на чашку.
6. Нанести по одной маленькой капле крови рядом с каплей цоликлона (В 10 раз меньше).
7. Смешать кровь с раствором цоликлона отдельными стеклянными палочками.
8. Наблюдать в течение 2,5 мин и оценить реакцию по следующей схеме:

ПРИЛОЖЕНИЕ Г

Подготовка пациента к гемотрансфузии:

1. 2.

3. 4.

5. 6.

7. 8.

1.Определить группу крови пациента и донора.
2. Определить резус-принадлежность пациента и донора.
3. Взять кровь на общий анализ крови.
4. Взять мочу на общий анализ мочи.
5. Проверить годность крови во флаконе.
6. Не есть за 2 часа до гемотрансфузии.
7. Опорожнить мочевой пузырь перед переливанием крови.
8. Подсчитать пульс, измерить артериальное давление и температуру тела.
9. Поставить приборы на индивидуальную совместимость по группе крови и по резус-фактору.
10. Поставить биологическую пробу.

ПРИЛОЖЕНИЕ Д

ПРОТОКОЛ ГЕМОТРАНСФУЗИЙ

(ОБРАЗЕЦ)

1. Пациент (ФИО)

2. № истории болезни __________________

3. Группа крови и резус-фактор пациента __________________________

4. Показания к гемотрансфузии ____________________________________

5. Наименование компонента______________________________________

6. Паспортные данные компонента: N __________, донор ________, гр.

крови _______, резус-фактор __________, дата заготовки ___________

7. Наименование, номер серии и количество ресуспендирующего

раствора ______________________________

8. Макрооценка компонента _______________________________________

9. Результаты исследования перед переливанием: определение группы

крови пациента ___________, компонента ___________, реакция на

совместимость по системе АВО___________

10. Время и способ подогрева среды ______________________________

11. Дата и время проведения трансфузии __________________________

12. Метод и скорость трансфузии _________________________________

13. Количество перелитой среды __________________________________

14. Состояние пациента (пульс, АД, температура тела):

Перед трансфузией _____________________

Во время трансфузии ___________________

После трансфузии:

Через 1 час __________________________

Через 2 часа __________________________

Через 3 часа __________________________

15. Количество и макрооценка первой порции мочи __________________

ПРИЛОЖЕНИЕ Е

АНКЕТА

Прошу Вас ответить на несколько вопросов.

Обведите номер варианта ответа, соответствующего Вашему мнению или напишите свой вариант на свободных строках. Имя и фамилию указывать не нужно. Данные будут использоваться только в обобщенном виде.

1. По каким показаниям наиболее часто производите переливание крови? __________________________________________________________

Выявление признаков непригодности крови к переливанию.

Показание: определение годности крови к переливанию.

Оснащение: флакон или контейнер с кровью.

Последовательность действий:

1. Оценить герметичность упаковки:

Упаковка должна быть абсолютно целостной;

Никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличии кровь непригодна для переливания.

2. Оценить правильность паспортизации:

· - наличие этикетки с номером;

· - даты заготовки;

· - обозначение группы крови и резус принадлежности;

· - наименование консерванта;

· - фамилии и инициалов донора;

· - наименование учреждения- заготовителя;

· - подпись врача;

· - штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит.

3. Обратить внимание на срок годности крови, сопоставить его с датой переливания, оценить визуально кровь во флаконе:

· кровь должна быть разделена на три слоя (внизу – красные эритроциты, выше - узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней - желтая прозрачная плазма);

· плазма должна быть прозрачной;

· хлопья, плёнки, сгустки в плазме свидетельствуют о её инфицированности и непригодности к переливанию;

· розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию.

Примечание : Плазма может быть непрозрачной в случае так называемой хиллезной крови, т.е. крови, содержащей большое количество нейтральных жиров. При нагревании хиллезной крови до 37 0 С, плазма становится прозрачной, если же кровь инфицирована - остаётся мутной.

Составление набора и определение групповой принадлежности крови по стандартным сывороткам.

Показания: необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательству.

Оснащение:

· 2 серии стандартных гемагглютинирующих сывороток в специальных штативах;

· флакон с изотоническим раствором хлорида натрия;

· маркированные планшеты;

· пипетка для взятия крови;

· пипетка для изотонического раствора;

· песочные часы на 5 минут;

· перчатки.

Примечание. Определение группы крови проводится в помещении с хорошим освещением и температурой от + 15 0 до +20 0 .

Манипуляцию выполнять в перчатках.

При наличии повреждений на коже медсестра временно отстраняется от работы.

В случае попадания крови на кожу или слизистые провести обработку по действующей инструкции (см. «Асептика, антисептика»).

Последовательность действий:

1.Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по:

· цветовой маркировке;

· внешнему виду (светлая, прозрачная);

· сохранности ампулы;

· наличию правильно оформленной этикетки с указанием группы крови, титра, срока годности, места приготовления.

2.Разместить на столе:

· 2 комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток трёх групп (О, А, В) двух серий и одну ампулу с сывороткой АВ (ІV), каждая ампула должна иметь пипетку;

· флакон с изотоническим раствором, пипетку;

· стерильный маркированный планшет;

· предметные стёкла (стеклянные палочки);

· пипетку для взятия крови;

· песочные часы.

3. Написать на планшете Ф.И.О. пациента, группу крови.

4. Нанести на планшет по одной капле (0,1 мл.) стандартных гемагглютинирующих сывороток трёх групп двух серий в соответствующие гнезда планшета.

5. Нанести каплю крови из пальца или из пробирки пипеткой в соответствующую ячейку.

6. Поместить в каждое гнездо планшета, рядом с сывороткой, по одной маленькой капле (0,1 мл.) исследуемой крови в соотношении кровь: реагент 1:10 (кровь забирать из большой капли, используя для этого разные стеклянные палочки).

7. Смешать кровь с реагентом, после смешивания планшет осторожно покачать в руках.

8. Добавить по одной капле 0,9 % раствора натрия хлорида к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, но не ранее, чем через 3 минуты.

9. Оценить результат через 5 минут после начала реакции:

· - реакция агглютинации может быть положительной и отрицательной;

· - если сыворотки дали положительную реакцию, значит, кровь содержит оба агглютиногена АВ, в этом случае следует провести дополнительное контрольное исследование со стандартной сывороткой группы АВ (IV).

Похожая информация:

1. III. Методика измерений и расчетные формулы. I. Цели работы: определение ускорения свободного падения по периоду колебаний математического и оборотного физического маятников